удк 619:616.155.392:636.22/28:612.1

 

ПРИМЕНЕНИЕ «МУЛЬТИСКАН МУЛЬТИСОФТ» ДЛЯ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА ИНФЕКЦИИ ВИРУСА ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

 

Ю.В. Итэсь (ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РАСХН, г. Новосибирск), М.Н. Ткаченко (Ветеринарная лаборатория Югры, г. Ханты-Мансийск)

 

Вашему вниманию представляется пример использования вертикального фотометра со сменными фильтрами для серологического исследования крупного рогатого скота на предмет инфекции вируса лейкоза методом иммуноферментного анализа. Однако прежде необходимо осветить принципы метода.

Оптическая система прибора базируется на концепции вертикального фотометра, при которой пучок света проходит через весь образец. В вертикальном фотометре поглощение света пропорционально количеству поглощающего вещества в кювете. Абсорбция вычисляется по следующей формуле:

,

где A - абсорбция, a - молярная абсорбция вещества, M – масса поглощающего вещества, S – площадь зоны пропускания света.

Вертикальная фотометрия имеет следующие преимущества:

-             неточное пипетирование непоглощающих жидкостей не влияет на результаты измерений;

-             испарение непоглощающих жидкостей также не влияет на результаты измерений;

-             расслоение раствора, например при турбидиметрических измерениях, не влияет на результаты измерений.

Мультискан МУЛЬТИСОФТ является восьмиканальным фотометром со сменными фильтрами, который позволяет проводить фотометрические и агглютационные измерения в прозрачных 96-луночных планшетах или наборных плашках (стрипы) с плоским дном.

Длинна волны измерения (340-750 нм) автоматически выбирается с использованием восьми интерференционных фильтров расположенных в колесе.

Имеется шесть режимов измерений (включая контроль ЭВМ) и восемь режимов вычислений, которые позволяют обработать полученные результаты.

Полученные результаты, через систему интерфейсов могут быть переданы на ЭВМ и/или внешний принтер. Прибор снабжен встроенным принтером для распечатки результатов.

Мультискан МУЛЬТИСОФТ может использоваться для различных колориметрических и турбидиметрических измерений, например ИФА или микробиологических анализов.

Для диагностики инфекции ВЛКРС применяли набор иммуноферментного анализа антител к антигену gp51 вируса лейкоза крупного рогатого скота производства НПО «Нарвак».

Принцип метода. Антиген gp51 ВЛКРС, иммобилизированный на поверхности лунок полистероловой микропанели с помощью специфических моноклональных антител, связывается с антителами, присутствующими в исследуемом материале, формируя при этом комплекс антиген-антитело. Полученный иммунный комплекс выявляется после взаимодействия с антивидовым коньюгатом (моноклональные антитела к IgG крупного рогатого скота, меченные пероксидазой), фермент которого после добувления субстрата, вызывает разложение субстрат-индикаторного раствора и образование окрашенного продукта. При этом интенсивность окраски в лунке микропанели пропорциональна содержанию ВЛКРС-специфических антител в исследуемой пробе.

Чувствительность ИФА выше, чем метода иммунодиффузии в геле агара на 10-15%.

Использование данного прибора позволяет проводить экспресс-диагностику и исключить погрешности, связанные с человеческим фактором.

 

 

APPLICATION of «MULTISKAN MULTISOFT» FOR ELIZA of a  BLV INFECTION in CATTLE

 

U.V. Ites, M.N. Tkachenko

 

The example of use of a vertical photometer with removable filters for serological examination of cattle is represented to attention for a BLV infection by ELISA.

The ELIZA sensitivity is higher, than AGID on 10-15%.

Use of the MULTISKAN MULTISOFT device allows to carry out express-diagnostic and to exclude errors, bound with the human factor.