Преимущества и перспективы микродисперсных форм убитых вирусных вакцин для массовой пероральной вакцинопрофилактики домашней птицы.
Леонов С.В.,* Порываев В.Д.,** Сергеев А. Н.** *
** ГНЦ Вирусологии и биотехнологии “Вектор”.
Использование кроссов птицы с генетически закреплённой высокой продуктивностью, сосредоточение большого количества голов на малой площади, широкое применение антибиотиков, перманентное действие самых разнообразных стрессирующих агентов – все эти факторы существенно повышают риск возникновения инфекционных заболеваний самой разнообразной этиологии.
На этом фоне, наравне с созданием оптимальных зоогигиенических условий и поддержанием естественной резистентности на должном уровне, активная специфическая профилактика остаётся достаточно надёжным средством сдерживания инфекционных болезней. Однако следует признать, что такая необходимая мера как вакцинация, довольно часто является фактором, неблагоприятным образом отражающаяся на организме птицы. В большей мере, все отрицательные последствия проведения вакцинации обусловлены недостатками самих методов введения антигенного материала в организм. На практике, из множества разнообразных методов по-прежнему широко распространены парэнтеральные методы (по причине технической простоты, доступности и надёжности). Но с другой стороны, нельзя не отметить такие отрицательные стороны этих методов, как высокий уровень травматизма, большая трудоёмкость, снижение общей естественной резистентности и продуктивности птицы (вызванное последствиями стрессовой реакции). При их применении существует опасность распространения некоторых инфекций, образования “холодных” абсцессов и некрозов на месте введения вакцины, инициирования аутоиммунных артритов и т. д. В связи с отмеченными выше недостатками, в разных странах мира проводился активных поиск альтернативных методов введения антигенного материала.
Введение вакцин аэрозольным методом показало себя высоко эффективным, прежде всего против инфекционных агентов с повышенной тропностью к респираторному тракту. Но данный метод введения нуждается в специальных приспособлениях (аэрозольных генераторах, компрессорах) и имеет определённые трудности для практиков в дозировании вакцинного материала.
Поэтому большинство специалистов заинтересованы в использования корма и воды в качестве субстрата, содержащего антигенный материал. Принимая во внимание насыщенность лимфоидными образованьями пищеварительного и респираторного трактов птиц, становиться очевидным привлекательность оральных методов вакцинации (и особенно – с энтеральной доставкой антигена). Первые попытки применения живых вирусных вакцин, сорбированных на кормовые частицы (зерно) или в виде лактозных драже, оказались недостаточно эффективными. Прежде всего, это было обусловлено деструкцией антигенов агрессивными факторами желудочно-кишечного тракта птицы. Кроме того, в случае убитых вирусных вакцин (или рекомбинантных белков-антигенов) необходимо одновременно решать проблему иммуноадьювантов.
Такие возможности могут обеспечить микродисперсные системы доставки (типа микрочастиц – микрогранул, микрокапсул ), обеспечивающие защиту включенных в них антигенов от агрессивных факторов внешней среды и способные формировать усиленный иммунный ответ (включая иммунитет слизистых оболочек). Первые успехи в конструировании вакцин нового поколения связаны с применением в качестве носителей липосом. Но липосомальные вакцинные формы с высокой эффективностью включения антигена сложны в приготовлении и не обеспечивают достаточной сохранности антигенного материала при пероральном применении. Новые варианты липосомальных носителей, пригодные для пероральной доставки, предполагают сложные составы и методы приготовления и пока мало перспективны для массовой вакцинации в ветеринарии.
Новый всплеск разработок микродиспесрных форм связан с применением биодеградируемых полимеров (природных и синтетических), которые совмещают иммуноадъювантное действие и способность формировать структуры, способные защищать антиген от факторов ЖКТ. Особый интерес для пероральной иммунизации представляют мелкие биодеградируемые микрочастицы с размерами до 3 мкм (проникающие в иммунокомпетентные клетки иммунных органов кишечника птицы) и способные усиливать как клеточный, так и гуморальный иммунный отклик к инкапсулированному антигену. Развитие нашли две альтернативные методологии, предполагающие включение антигена (изолированные вирусные белки-антигены или цельные вирусные частицы) либо в полые микросферы (например, на основе сополимера полимолочной и полигликолевой кислот), либо в гидрогелевые микрогранулы например, на основе полиметилметакралата и/или природных полимеров). Такие микрочастицы могут быть в дальнейшем сформированы в виде суспензий или гранул, распадающихся в кишечнике на отдельные нерастворимые микрочастицы. При этом полимер в течение заданного периода образует для антигена оболочку, защищая от экстремальной кислотности желудочного сока, желчных кислот и их солей, протеолитических ферментов желудочно-кишечного тракта (I.H. Eldridge, K. Staas, F. D. Meulbroek et al, 1990). К настоящему времени предложено значительное количество материалов различного происхождения, пригодных для формирования различных носителей и адъювантных конструкций (полиакрилаты, DDA, Квил А, полистиренсульфонат, Фикол С 400 и т.д.) Но наибольший интерес для целей пероральной доставки антигенов представляют биодеградируемые в организме полимеры, используемые в фармацевтической и пищевой промышленности и в хирургии, распадающиеся в организме через заданный период на физиологически безопасные вещества.
В настоящее время, на базе ГНЦ ВБ “ВЕКТОР” и ГНУ ИЭВСиДВ проводятся разработки микродисперсной поливалентной инактивированной вакцины против болезни Ньюкасла, ССЯ-76 и инфекционного бронхита кур для перорального применения на основе недорогих микродисперсных носителей. В результате экспериментов на модельных антигенах отработаны варианты схемы приготовления микродисперсных форм вакцины и выбран ассортимент составов носителей, позволяющий провести оптимизацию и выбор наиболее эффективных и перспективных вариантов.