ÂÂÅÄÅÍÈÅ

ПРЕПАРАТЫ НА ОСНОВЕ РИБОНУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ В ПРОФИЛАКТИКЕ И ЛЕЧЕНИИ ИНФЕКЦИОННОЙ ПАТОЛОГИИ ПЛОТОЯДНЫХ

Аликин Ю.С., Ноздрин Г.Н., Шмидт Ю.Д., Луконина Н.В.

Научно-исследовательский конструкторско-технологический институт биологически активных веществ (НИКТИ БАВ) ГНЦ ВБ "Вектор", г. Бердск, Новосибирской обл.

Факультет ветеринарной медицины Новосибирского Государственного Аграрного Университета (НГАУ), г. Новосибирск

ВВЕДЕНИЕ

Исследованиями последних десятилетий в области биологически активных веществ выявлена чрезвычайно важная роль нуклеиновых кислот в регуляции резистентности организма и животных, повышения неспецифической устойчивости организма к неблагоприятным воздействиям, коррекции иммунодефицитных состояний.

Препараты на основе рибонуклеиновых кислот способны выступать в качестве противовирусных средств, стимуляторов неспецифической резистентности, развития и гемопоэза, иммуномодуляторов, иммуноадъювантов при вакцинации, антимутагенов и эффективных радиопротекторов.

В последние годы в НИКТИ БАВ ГНЦ ВБ "Вектор" на основе двуспиральной и высокополимерной РНК из дрожжей созданы новые препараты для ветеринарной медицины - вестин и полирибонат, обладающие всеми вышеуказанными свойствами. Препараты, применяемые в терапевтических дозах является практически не токсичными соединениями, не обладают кумулятивными, местно-раздражающими и аллергизирующими свойствами. Такая широта спектра действия вестина и полирибоната, высокая степень экологической безвредности, завершенность работ по НИР и НИОКР, а также государственной регистрации в Департаменте ветеринарии РФ позволяет представить их для успешного и быстрого внедрения в ветеринарную практику.

Двуспиральные (дс)РНК являются перспективными биологическими модификаторами. Их эффекты, даже при очень низких концентрациях, реализуются как на молекулярном, так и клеточном и органном уровнях [1]. Основные противовирусные эффекты дсРНК связаны главным образом с быстрым и мощным синтезом интерферонов в организме.

Противовирусные эффекты препарата вестин (ридостин), разработанного в НИКТИ БАВ на основе дсРНК, изучены на разных видах животных и классах позвоночных, в том числе, у млекопитающих на сельскохозяйственных животных (крупном рогатом скоте и свиньях) и домашних (собаках), птицах и рыбах. Как показано в работах многих авторов [2, 3], препарат обладает чрезвычайно широким спектром противовирусных эффектов на различных семействах вирусов, определенных in vivo как у лабораторных, так и сельскохозяйственных животных. Однако эффективность его действия значительно колеблется, что связано, в первую очередь, по-видимому, со степенью отработанности схемы применения. Там, где эта схема оптимально подобрана, противовирусная эффективность препарата характеризуется высокими показателями защиты животных. Нельзя отвергать и то обстоятельство, что это может являться отражением чувствительности и устойчивости определенных семейств вирусов к интерферонам [4, 5]. Так, арбовирусы отличаются выраженной чувствительностью к действию на них интерферона, поэтому их использовали как модель (на примере вируса ВЭЛ) для изучения основных закономерностей становления и развития клеточной резистентности.

Полученные данные затрагивают проблему эволюции системы интерферона как одной из составляющих гомеостаза организма. Действительно, тот факт, что интерферон (или семейство интерферонов) обнаруживаются только у позвоночных [4, 6], а индукторы интерферона на основе дсРНК осуществляют свои противирусные эффекты и у растений [7], может говорить о том, что система противовирусной резистентности сформировалась в эволюции параллельно с возникновением самих вирусов, она значительно старше эффекторов такой системы (интерферонов) у позвоночных. Это дает основание строить стратегию противовирусной защиты с привлечением препаратов на основе дсРНК для широкого круга организмов.

СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ

Особенности вирусных инфекций у собак

Особенности эпизоотологии . К 1989 году в России использовалось около 700 тыс. собак служебных, охотничьих, пастушьих, приносящих 100 млн. рублей дохода [8]. В настоящее время интенсивно развивается домашнее собаководство. При этом численность высокопородных собак, наиболее подверженных инфекционным заболеваниям, возросла по скромным оценкам до 1 млн. К наиболее опасным вирусным заболеваниям собак относятся чума и парвовирусный энтерит [9].

Чума собак отличается высокой контагиозностью и наносит экономический ущерб, превышающий сумму ущерба от всех вместе взятых инфекционных и незаразных болезней собак.

85% особей всех возрастов способны заболевать чумой [8]. На фоне вакцинации собак их заболеваемость чумой в 1981-83 гг. в возрасте 3-7 мес, 7-12 мес и старше составила соответственно 4,39; 1,49 и 0,45%. Таким образом, суммарная заболеваемость собак чумой составила 5,23% [9]. В настоящее время имеется тенденция роста этого наиболее опасного заболевания. Заболеваемость парвовирусным энтеритом может достигать 13,4 % [10]. Основываясь на вышеизложенном, при общей численности собак в стране 1,7 млн., количество заболевших чумой и энтеритом может составить 87,0 тыс. (5,23 %) и 227,8 тыс. (13,4 %).

Другие вирусные инфекции

Кроме бешенства, которое успешно профилактируется вакцинацией собак [9], другие вирусные инфекции собак имеют не такое широкое распространение как чума и парвовирусный энтерит. К ним относится аденовироз собак [11]. При аденовирозе поражаются верхние дыхательные пути, легкие, кишечник. Выделены два носителя вируса CAV-1 и CAV-2 [12-14]. Патогенетическое отличие серотипов аденовирусов заключается в их тропности. Для CAV-1 характерен гепатоэндотелиальный тропизм. Для CAV-2 - преимущественное поражение эндотелия респираторных органов. Аденовироз может передаваться другим диким плотоядным: черным медведям [15], что и предполагается учитывать при пероральной вакцинации собак [16], енотов, лис, скунса, мангуст [17].

Герпетические вирусные инфекции собак также поражают как взрослых животных, так и щенков. К ним относят болезнь Ауески (псевдобешенство, инфекционный бульбарный паралич) [9], вызываемую вирусом близким к вирусу герпеса, а также истинную герпетическую инфекцию, выделенную и охарактеризованную японскими исследователями [18-21]. По-видимому, существует гомология между герпесвирусом-1 кошек и герпесвирусом собак [22].

Собаки поражаются коронавирусными инфекциями, которые могут быть причиной гастроэнтеритов. В США создано несколько вакцин против коронавирусов собак [23, 24].

Инфекционный гепатит у собак сходен с таковым других плотоядных. Вирус устойчив к физическим факторам. Характерным является длительное вирусоносительство [9]. Этой проблеме посвящен ряд работ отечественных и болгарских исследователей [25-28].

Таким образом, другие вирусные инфекции собак могут быть опасными как для этого вида плотоядных, так и переноситься диким их представителям. Не существует и не разработано специфической терапии приведенных выше вирусных заболеваний собак.

Возможные секундарные инфекции.

Характер и серьезность наблюдаемых симптомов во многом определяется способностью организма собак синтезировать достаточное количество антител в инкубационный период. Если титр специфических антител низкий, то вирус размножается в тканях и органах, вызывает клиническую форму заболевания. В ряде случаев уровень антител недостаточен для нейтрализации вирусов. На биосинтез антител в организме существенное влияние оказывают вторичные секундарные инфекции [29, 30].

Вирусные заболевания, и особенно парвовирусный энтерит, довольно часто сопровождается возникновением вторичных секундарных инфекций [31-36]. Происходит это вследствие того, что условно-патогенная микрофлора, постоянно присутствующая в желудочно-кишечном тракте, при первичном вирусном поражении кишечника трансформируется в патогенную и в большей мере усугубляет течение инфекционного процесса. Так как секундарные инфекции, подавляя защитные реакции организма, способствуют резкому сокращению биосинтеза антител в организме, а следовательно, и увеличению степени тяжести течения заболевания. Более того, есть мнение, что в большинстве случаев тяжесть проявления энтеритов определяется синергидным действием поражения других физиологических систем организма [37]. У щенков в возрасте от 3 недель до 7 мес. энтериты сопровождаются поражением сердечной мышцы - миокардит. Летальность при этой форме достигает 70%. Иногда при этом отмечается внезапная смерть внешне совершенно здоровых собак.

Чума собак, как правило, протекает с осложнениями при активизации в легочной ткани. Кожные проявления чумы осложняются условно-патогенными дрожжеподобными грибами, стрептококками и стафилококками [9]. Способствуют возникновению вирусных заболеваний и осложняют их течение глистные инвазии. Заболевания на фоне инвазионных болезней протекает особенно тяжело, так как гельминты оказывают и прямое токсическое действие на организм животного.

Следовательно, терапия вирусных заболеваний должна всегда проводиться с учетом возможного развития секундарной инфекции и быть комплексной.

Диагностика вирусных заболеваний у собак

При диагностике вирусных болезней типа чума и парвовирусный энтерит особое внимание необходимо уделять тщательному анализу анамнестических данных, так как диагностика в существующих условиях основывается практически на клиническом проявлении заболевания. Трудность диагностики сводится либо к начальным формам заболевания, либо к абортивным формам течения болезней.

Глистная инвазия, нарушения обмена веществ, гиповитаминозы, отравления и т.д. затрудняют диагностику вирусных болезней, так как в значительной степени стирают клиническую картину, характерную для вирусных болезней. В нашей стране единственным способом лабораторной диагностики чумы пока остается обнаружение телец включений на слизистой оболочке мочевого пузыря [9], но предпринимаются попытки разработать другие методы [38-44]. Существующие лабораторные методы исследования мало эффективны ввиду их сложности выполнения, дороговизны и отдаленности результатов. Поэтому очень важны исследования по молекулярной биологии вируса чумы плотоядных и парвовируса, открывающие дорогу к созданию современных методов диагностики и усовершенствованных вакцин [45-51].

Для лабораторной диагностики павовирусного энтерита собак в России и за рубежом применяют РГА, РТГА, РН, МФА, ИФА, выделение вируса в первичных и перевиваемых культурах клеток, гистологический метод [52-57].

Направленность лечения вирусных заболеваний

Лечение чумы и энтерита достаточно эффективно, если оно проводится в начале заболевания и комплексно. В настоящее время предложены различные схемы лечения чумы и павовирусного энтерита собак [8-10, 58]. Все они предусматривают проведение симптоматической терапии, повышение естественной резистентности организма и профилактику секундарных бактериальных инфекций. Предпринимаются попытки воздействовать на основной фактор заболевания - вирусы. В последний период довольно широко и достаточно эффективно используются иммуномодулирующие средства [59-61]. Однако, эффективность лечения оставляет желать лучшего ввиду отсутствия лекарственных средств, обладающих прямым, этиотропным действием на вирусы в организме.

Существующая профилактика вирусных болезней основана на проведении вакцинаций животных с трехмесячного возраста. Анализируя результаты заболеваемости ранее вакцинированных животных можно заключить, что в целом ряде случаев вакцинация не дает стойкого иммунитета и животное, ранее вакцинированное, заболевает. Наибольший прорыв иммунитета наблюдается при вакцинации ЭПМ (ЭПМ-сухая инактивированная) против чумы собак [62-66].

Основным направлением профилактики вирусных болезней, на наш взгляд, является создание живых аттенуированных штаммов вакцин против чумы и энтерита, которые в активной форме создают более прочный иммунитет [67, 68], или, как говорилось выше, использовать весь набор современных адъювантов-иммуномодуляторов. Важное значение в профилактике вирусных заболеваний плотоядных имеет применение в особо опасные периоды жизни щенков (3,5-7мес.) препаратов с выраженным противовирусным действием (иммуноглобулины, интерферон или его индукторы).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Изучение эффективности препарата вестин у собак

Эффективность препарата вестин против чумы плотоядных и парвовирусного энтерита у собак оценивали в условиях применения препарата в ветеринарных клиниках и на базах питомников служебных собак. Изучение эффективности применения препарата вестин у собак, при чуме плотоядных проводили в условиях ветеринарных клиник (г.Бердск,Новосибирской области и Ветфак НГАУ). Испытание вестина выполнено на 20-ти собаках с различными формами чумы. Испытания препарата вестин проводили на собаках обоего пола различных пород и разного возраста. Препарат вестин применяли на фоне общепринятых способов лечения.

Собакам, заболевшим чумой (кишечная и легочная форма), введение вестина осуществляли в/м. Препарат растворяли в 0,5-1,0%--ном растворе новокаина и вводили в дозе 0,2-2,0 мг/кг массы тела, но не более 4-8 мг на животное. Инъекции вестина проводили один раз в 2-3 суток в трехкратном режиме.

Аналогичная процедура применялась при лечении парвовирусного энтерита.

Кроме того, на базе питомника служебных собак препарат использовали в виде капель. Перед употреблением содержимое ампулы (8 мг) растворяли в 2 мл 0,9%-ного натрия хлористого (физиологический раствор). Готовый раствор закапывали на конъюнктиву нижнего века и на слизистую носа по 3-4 капли три-четыре раза в день 7 дней подряд. Клинически здоровым щенкам, находившимся в контакте с заболевшими, с профилактической целью также закапывали вестин. На протяжении экспериментов животные подвергались клиническому обследованию.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Изучение лечебной эффективности препарата вестин у собак

Среди инфекционной патологии домашних животных в последние годы более широко распространены заболевания вирусной этиологии. К преимущественно встречающимся вирусным болезням у собак относятся чума и парвовирусный энтерит. Эти болезни регистрируются в течение всего года. В силу того, что вирусы, вызывающие эти заболевания, довольно широко распространены в природе, идет постоянное инфицирование животных.

Чума и парвовирусный энтерит собак чаще протекают в острой форме со значительной летальностью. Объясняется это высокой вирулентностью возбудителя, частыми осложнениями сопутствующими секундарными инфекциями и низкой эффективностью применяемых средств лечения. Предлагаемые схемы лечения, указанных инфекционных заболеваний, предусматривают проведение симптоматической терапии, повышение естественной резистентности организма и профилактику вторичных, секундарных бактериальных инфекций. В последний период достаточно эффективно используют интерферон и его индукторы при лечении собак с диагнозом чума и парвовирусный энтерит.

В табл.1 представлены данные изучения эффективности вестина при чуме у собак.

Из представленных данных видно, что применение вестина перспективно для лечения всех форм чумы, наблюдаемых нами у собак. Обобщая результаты, полученные в процессе лечения препаратом вестин различных форм чумы у собак, можно видеть, что из 20 животных погибли две собаки, заболевшие легочной формы чумы, что составляет 10%. По статистическим данным смертность от этого заболевания может достигать 80%. полученные данные убедительно демонстрируют эффективность вестина, который снижает летальность до 10%,а препарат может рассматриваться как перспективное средство для лечения этого вирусного заболевания (табл.1).

Исследование эффективности вестина при парвовирусном энтерите проводилось по такой же схеме профилактики и лечения, как и при чуме собак. Так, в питомниках служебных собак показано, что профилактическое применение вестина повышает устойчивость собак к этому заболеванию. При помещении новых 55 собак в питомник 15 животным был введен препарат вестин в/м, а 40 - не подвергались аналогичному воздействию. Спустя 10-12 дней из 40 собак заболели пять, а остальные переболели в течение месяца, несмотря на проводимое симптоматическое лечение. В опытной группе животных в течение 25 дней ни у одной не наблюдалось проявления заболевания, только на 28 сутки заболело четверо животных. Болезнь в этой группе протекала более легко.

Таблица 1 Результаты изучения эффективности препарата вестин при вирусных заболеваниях у собак

Форма заболевания	Кол-во заболевших животных	Доза, мг/кг	Кол-во инъекций	Выздоров- ление (гол)	Гибель (гол)	Эффективность лечения, %
Чума плотоядных из них:	20	0,72		18	2	90
Кишечная форма	7	0,44	3-4	7	-	100
Кишечно-легочная	3	0,70	3-4	3	-	100
Легочная форма	10	0,93	2-3	8	2	80
Парвовирусный энтерит	19	1,3	3	16	3	84

Применение вестина в другом эксперименте, на фоне заболевания парвовирусном энтеритом, проводилось на 19 животных. Результаты представлены в табл. 1.

Полученные данные достаточно убедительно характеризуют лечебную эффективность вестина при в/м введении собакам с парвовирусным энтеритом. Курс лечения колебался от 3 до 7 дней. Следует заметить, что у собак после введения препарата в дозе 2 мг/кг и выше наблюдалась выраженная аллергическая реакция, которую удавалось купировать десенсибилизирующими средствами. Необходимо отметить, что повышенную аллергическую реакцию наблюдали и при использовании вестина при чуме собак. Уменьшение дозы вводимого препарата до 1 мг/кг полностью снимало аллергические проявления.

Наряду с общепринятой схемой лечения парвовирусного энтерита у собак, нами впервые использовано сочетание применения индуктора интерферона с пробиотиком (бактерином-SL), который позволяет предотвратить секундарные бактериальные желудочно-кишечные инфекции. Суммируя данные, можно видеть, что введение вестина в дозе 0,2-2,0 мг/кг внутримышечно привело к выздоровлению 16 из 19 собак, что составляет 84 %, и сокращению сроков лечения.

В другой серии экспериментов оценивали влияние на течение парвовирусного энтерита у собак породы немецкая овчарка. В этих экспериментах вестин в виде капель в нос и в глаза. В группе животных из 25 щенков в возрасте 2-3 месяцев заболело 14 особей. Закапывание препарата на фоне комплексной терапии начинали с первого дня заболевания всем животным. Из 14 заболевших щенков выздоровело 11, погибло три. Оставшиеся 11 особей, к которым применялся вестин профилактически, не болели вовсе.

Таким образом, в представленном в разделе работы впервые продемонстрирована противовирусная активность вестина против чумы плотоядных и парвовирусного энтерита. Характерно, что применение его в последнем случае эффективно и при непарентеральном способе.

Сравнительные экспериментальные данные о противовирусной активности вестина у высших и низших позвоночных представлены в табл. 2.

Следует отметить, что у млекопитающих продолжительность защитного эффекта после однократного применения дсРНК значительно короче и составляет около 24 ч [2]. Существуют отдельные сведения о сохранении противовирусной резистентности у поросят в течение 6 дней после введения индуктора, но авторы не связывают этот факт с активацией интерферонзависимых механизмов [69]. Эти сравнительные эффекты препарата вестин у высших и низших позвоночных описаны нами впервые и представляют как практический, так и теоретический интерес.

Таблица 2. Экспериментальные данные о противовирусной активности вестина у некоторых высших и низших позвоночных

Животные	Заболевание	Семейство	Доза вируса LD₅₀	Время применения дсРНК,ч	Защитный эффект,%
Собаки	Чума Парвови русный энтерит -	Паромиксо- вирусы Парвовирус	Не исследована Не исследована	-24 +108 -24 +48	90-100 84
Мыши	Бешенство	Рабдовирус	6 3	+4 +4	- 30
Карп	Весенняя виремия	Рабдовирус	10^7,03 - 10^7,8	-21(дни)	70 (55-85)

(-) - время до инфицирования; (+) - время после инфицирования.

Хронодинамика вестина (ридостина) при лечении собак больных чумой

Выполненная нами работа рассматривает терапевтическую эффективность вестина (ридостина) при лечении чумы собак. Для повышения эффективности любого препарата важно знать особенности его взаимодействия с системами организма в зависимости от биоритмов, физиологической и патологической их активности. Для определения влияния суточного биоритма на фармокодинамику вестина (ридостина) изучали особенности его действия на организм при применении утром и вечером.

Условия эксперимента. Экспериментальные работы проводились в условиях питомника служебных собак при заболевании щенков европейской овчарки начальными стадиями чумой плотоядных (Pestis canum). Для проведения эксперимента больным животным с лечебной целью вводили внутривенно вестин (ридостин) в дозе 4 мг раз в сутки в течение 3 дней. Было сформировано три группы собак в возрасте 3-6 месяцев: 1-я - препарат вводился утром, 2-я - вечером, 3-я - контрольная, в которой лечение проводили без препарата, традиционным методом. В каждой группе наблюдалось по 5 животных. Как известно, чума - острое контагиозное заболевание собак, характризующееся лихорадкой, воспалением слизистых оболочек, пневмонией, кожной экзантемой и поражением нервной системы. Поэтому у каждого животного раз в сутки (утром) измеряли температуру тела, пульс и частоту дыхания. Эти показатели отражают состояние основных физиологических систем организма. Наблюдения осуществляли в течение 10 суток до полного излечения животных.

Результаты эксперимента. Установлено, что под влиянием вестина (ридостина) клинико-физиологическое состояние животных изменяется в зависимости от суточного биоритма. Изменение температуры тела у собак всех трех экспериментальных групп представлены на рис. 1. При применении вестина утром, с 8 до 9 часов, регистрировали снижение температуры тела у собак на 3-ий день после введения препарата, затем на 5-й день наблюдали вновь подъем температуры, а в последующие сутки её снижение до физиологической нормы на 8-ой день. Иная картина наблюдалась после введения вестина животным 2-й группы в вечернее время с 18 до 19 часов. На 2-ые сутки после инъекции препарата отмечали незначительный подъем температуры тела по сравнению с исходной и последующее её плавное снижение до физиологической нормы уже на 4-ые сутки лечения. У аналогов из контрольной группы на 3-ий день наблюдали резкое повышение температуры тела, а начиная с 4-го, происходило постепенное её снижение до физиологической нормы на 9-ый день.

Как известно, температура тела является не только обобщенным показателем метаболических характеристик организма, точным и чувствительным критерием регуляторных возможностей его, но и отражает уровень резистентности и вклад в неё системы цитокинов, лимфокинов и других клеточных гормонов. В первую очередь, в этом процессе важная роль отводится синтезу интерферонов [70], которые через систему эндогенных пирогенов (интерлейкинов-1, простогландинов и др.) повышают температуру тела [71-76]. Эта реакция организма носит приспособительный, адаптивный характер и обусловлена эволюционно сформированным механизмом потенцирования противовирусной эффективности интерферонов [77-81]. Очевидно, что индукторы интерферона должны также стимулировать подобный процесс в здоровом организме. Это неоднократно отмечается в процессе тестирования этих препаратов на лабораторных животных (мышах, крысах, кроликах, обезьянах). В то же время трудно прогнозировать степень термогенеза в больном организме, где индукция интерферона должна быть суммарным процессом, обусловленным как синтезом эндогенного интерферона за счет вирусного воздействия, так и за счет введенного препарата. Данные, представленные на рис. 1 являются подтверждением этого.

На рис. 2 представлены данные измерения пульса у собак опытных и контрольной групп. Пульс у собак всех групп в течение 2-х дней находился на одном уровне, хотя частота сердечных сокращений у животных, которым препарат вводили вечером, в среднем имела более низкий уровень. Он был меньше на 10 ударов чем у животных первой опытной группы. В контрольной группе на 3-4 ий день наблюдали увеличение пульса до 135 ударов в среднем. Затем во всех группах происходило сокращение пульса до физиологической нормы, но у животных 2-ой группы оно наступало на 6-ые сутки, в 1-ой на 8-й день, а контрольной на 7-ой. Необходимо отметить, что динамика показателей и температуры и пульса у животных в 1 и 3 групп в общем имела более общий характер, чем во 2-ой группе. Создается впечатление, что введение препарата вестин больным животным во второй половине суток более эффективно для лечебного процесса и нормализации физиологических показателей, отражающих это состояние.

Частота дыхания у животных перечисленных групп (рис. 3) подтверждает эти наблюдения. При введении препарата вестин собакам 2-ой опытной группы наблюдали более быструю нормализацию частоты дыхания, чем у животных 1-ой и контрольной групп.

Отмечено также, что при введении препарата вечером, заболевание протекало в более легкой форме, а позитивные изменения в составе крови более выражены. Введение препарата веcтин (ридостин) в схему лечения собак с диагнозом чума плотоядных (Рestis canum) повышает терапевтическую эффективность до 95% и сокращает продолжительность лечения на два дня.

Полученные данные свидетельствуют о более эффективном действии препарата при введении его вечером по сравнению с инъекцией препарата утром. При применении препарата вестин (ридостин) больным собакам не наблюдалось побочных явлений.

Таким образом, для повышения эффективности лечения собак, больных чумой, в схему терапии необходимо включать вестин (ридостин). С учетом биоритмологических особенностей действия препарата у собак его целесообразнее назначать в вечернее время с 18 до 19 часов.

Сравнительная оценка действия вестина (ридостина) с другими иммуностимулирующими

средствами при парвовирусном энтерите собак

Работа выполнена на Кафедре фармакологии и общей патологии Факультета ветеринарной медицины НГАУ (рук., доцент Ю.Д.Шмидт). Целью работы явилось сравнительное исследование эффективности вестина, тималина и Т-активина при лечении парвовирусного энтерита собак, уточнение и отработка оптимальных схем их применения. Для проведения исследования были сформированы опытные и контрольная группы по 5 животных в каждой, в возрасте от 4 до 6 месяцев со сходными признаками болезни. Применение иммуномодулирующих препаратов в опытных группах проводили на фоне традиционного терапевтического лечения, контрольная группа соответственно получала только его. Клиническая диагностика подтверждалась методом ИФА. Среди клинических признаков учитывались: температура тела, частота сердечных сокращений (ЧСС), частота дыхания (ЧД), анорексия, рвота, диарея. Проводились также гематологические исследования.

Клиническая оценка состояния животных

В исследуемых группах были получены следующие результаты оценки клинической картины.

Повышение температуры тела наблюдали в первые 2 дня только в 1-ой опытной группе, получавшей вестин. В остальных опытных и контрольной группах изменения температуры тела у животных были незначительны и оставались в пределах нормы.

Парвовирусный энтерит сопровождается стойкими нарушениями гемодинамических процессов в организме собак. Частота пульса и дыхания опосредованно указывают на выраженность этих изменений.

Применение вестина нормализовало эти показатели и в первой группе они оставались в пределах нормы: ЧСС 125 ± 05 и ЧД -23 ± 03. В остальных опытных и контрольной группах наблюдали изменения гемодинамики, наиболее выраженные у последних.

При парвовирусном энтерите отмечаются выраженные клинические признаки: анорексия, рвота и диарея, обусловленные вирусной интоксикацией и поражением слизистой кишечника собак.

Под действием вестина на фоне общепринятой терапии у 1-ой группы эти показатели нормализовались на 5-ый день лечения: появился аппетит, рвота и диарея прекратились. Во второй группе (с включением в лечебную схему тималина) к 6 дню появился аппетит и был сформирован кал. В 3-ей группе, леченных с включением Т-активина, нормализация наблюдалась к 7 дню. В контрольной группе животных, получавших традиционное лечение, состояние собак пришло в норму только к 8 дню.

Анализ полученных результатов опыта свидетельствует о характерном изменении клинической картины и течения инфекционного процесса у собак под действием иммуномодуляторов.

Так, включение вестина в традиционную схему лечения привело к стойкому улучшению состояния животных к 5-му дню лечения. При этом клиническое проявление болезни сопровождалось более легкими поражениями кишечника (слизисто-катаральный энтерит) и снижением токсицемии. Клинический статус у этих животных отличался высокой степенью адаптивной перестройки, проявлявшейся появлением субфебрильной лихорадки, как фактора неспецифической защиты в организме. В то же время у контрольных животных, несмотря на проводившуюся традиционную терапию, с момента начала лечения и в течение всего периода болезни отмечалась устойчивая гипотермия. Таким образом, степень выраженности температуры тела у собак, получавших вестин, несомненно свидетельствует об активации иммунокомпентентных процессов неспецифической защиты при данной вирусной инфекции.

Парвовирусный энтерит сопровождается острыми воспалительными процессами желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), вызванными вирусным поражением клеток слизистой оболочки, в первую очередь тонкого кишечника. Считается, что его эпителиальные клетки имеют рецепторы для кишечных вирусов. Адгезия вируса в этих клетках, их размножение и последующая трансформация новообразующихся клеток приводит к нарушению расщепления дисахаридов в тонкой кишке и всасывания моносахаридов. Избыточное количество ди- и моносахаридов приводит к увеличению осмотического давления, что препятствует всасыванию воды и даже, напротив, приводит к усиленному транспорту воду из тканей в просвет кишечника, вызванное, по-видимому, нарушением синтеза аквапаринов в клетках. Бактерии, находящиеся в просвете кишечника, ферментируют лактозу с образованием низкомолекулярных жирных кислот, что усиливает дегидратацию тканей макроорганизма. Все это приводит к острому клиническому состоянию, сопровождаемому рвотой, диареей и обезвоживанию.

В 1-ой опытной группе к 3-4 дню с момента начала лечения частота рвоты и дефекации была в среднем в 2,5 раза ниже, чем в контрольной. Эти показатели свидетельствуют о более успешной нормализации репаративных процессов эпителия ЖКТ у собак, получавших вестин.

Обезвоживание, как один из основных и угрожающих симптомов парвовирусного энтерита объективно является наиболее отягощающим синдромом данного заболевания. Именно оно приводит к срыву гемодинамических процессов в организме и сопровождается аритмией, нитевидным пульсом и одышкой. Можно считать, что причиной успешной и быстрой нормализации показателей ЧСС и ЧД у животных первой опытной группы по сравнению с контрольными, является нормализация тканевых процессов тонкого кишечника под действием препарата вестин.

Анализируя полученные результаты по клиническим признакам у животных 2 и 3 опытных групп, ролеченных с применением препаратов тималин и Т-активин, следует отметить существенное сходство их между собой. По сравнению с контролем клинические показатели этих групп характеризовались более стертыми проявлениями и были менее выражены, чем у животных, получавших вестин.

Результаты гематологических исследований

Гематологические показатели у исследуемых групп животных определяли до лечения, на третий день лечения и после выздоровления. Общий анализ крови всех 4-х групп до начала лечения характеризовался лейкопенией, эритроцитопенией, гипохромией и увеличением СОЭ. Если лейкопения и увеличение СОЭ являются характерными признаками парвовирусной инфекции собак, то снижение показателей красной крови являются не характерными и, по-видимому, являются отражением иммунодефицитного состояния в системе стволовых клеток красного мозга.

На 3-ий день лечения в 1-ой группе все гематологические показатели пришли в норму. Во 2 и 3-ей группах также наблюдалась положительная динамика всех показателей, но все же они оставались ниже нормы. В контрольной группе в это время все показатели были намного ниже нормы.

Гематологические исследования, проведенные через 3 дня с момента начала лечения, показывают, что применение препарата вестин способствовало повышению уровня гемоглобина, усилению регенерации костного мозга, приводило к повышению количества эритроцитов, общего количества лейкоцитов. Сравнительный анализ данных 2 и 3-ей опытных групп указывает на тенденцию начальной активации иммунитета и по сравнению с первой группой гематологические показатели были ниже. В контрольной группе показатели существенно отличались от опытных групп. Низкий уровень гемоглобина, эритроцитов, всех форм лейкоцитов свидетельствовали о значительных нарушениях гомеостаза и иммунитета у животных в этой группе. Полученные гематологические показатели на 3-ий день лечения напрямую коррелируют с клиническими данными, представленными выше.

При исследовании крови после выздоровления у животных 1, 2 и 3-ей опытных групп все гематологические показатели пришли в норму. У собак контрольной группы, несмотря на признаки клинического выздоровления, гематологические показатели приближались к нижней границе нормы.

Характеризуя гематологические показатели, следует отметить, что показатели в 1-ой группе животных, получавших вестин, в значительной степени отличаются от таковых в контроле. Они показывают, что пластические, репаративные и восстановительные процессы после перенесенной вирусной инфекции полностью обеспечены структурно-функциональными элементами. Высокий уровень гемоглобина, нормализация уровня лейкоцитов, увеличение количества лимфоцитов свидетельствует, что иммунологическая реактивность организма после выздоровления находилась на высоком уровне. Характеристика данных 2 и 3-ей опытных групп, позволяет сделать вывод о неполной реализации резервных возможностей организма под действием препаратов тималин и Т-активин.

Оценивая клинико-функциональный статус в этих группах следует указать на возможность рецидива по указанному заболеванию или возможность инфицирования другими вирусными заболеваниями. Животные контрольной группы относятся к животным группы риска, с возможностью рецидивирования, длительного восстановления физиологического статуса и дополнительной симптоматической коррекцией.

Включение препарата вестин в схему лечения парвовирусного энтерита позволяет давать стойкий прогноз по нормализации физиологических параметров систем организма на период после выздоровления и гарантирует полное выздоровление животных без осложнений.

Таким образом, проведенные испытания сравнительной оценки иммуностимуляторов вестина, тималина и Т-активина при лечении парвовирусного энтерита позволяет сделать следующие выводы: введение вестина внутримышечно в дозе 0,4 мг/кг, 1 раз в день, 4-дневным курсом приводит к усилению иммунного ответа и способствует активации противовирусного иммунитета; сравнительная оценка иммуностимулирующего действия препарата вестин с препаратами тималин и Т-активин позволяет сделать вывод о целесообразности включения в схему лечения препарата вестин из-за более быстрого и активного иммуностимулирующего эффекта; иммуностимулирующее действие вестина позволяет сокращать время лечения животных и ускоряет процессы выздоровления и нормализации клинико-физиологических показателей; применение препарата вестин в период лечения позволяет давать положительный прогноз о высокой иммунологической устойчивости животных на длительный период после выздоровления.

Результаты применения вестина (ридостина) и полирибоната у домашних животных в ходе широких производственных испытаний

Результаты применения вестина (ридостина) у домашних животных изложены в актах о производственном испытании . В г. Барнаул препарат использовали для лечения 16 собак различного возраста и породы, в г. Новосибирск препарат был применен при лечении 1500 домашних животных.

Состав нозологических форм болезней, при которых применяли препарат у собак, был следующим: чума, парвовирусный энтерит, аденовирусный гепатит. С целью повышения неспецифической резистентности вестин использовался при респираторных заболеваниях при пироплазмозе в период ремиссии этого заболевания, для активации ретикуло-эндотелиальной системы и гемопоэза, а также при других видах патологии, требующих иммунокоррекции: токсикоинфекции, вызванной сальмонеллезом, нефрите, дерматомикозе и демодекозе.

Дозы вестина (ридостина), указанные во Временном наставлении по применению препарата, вне зависимости от породы собак (овчарки, ротвейлеры, доберманы, боксеры, доги, ризеншнауцеры, мопсы, чау-чау, пикинессы и др.) могут быть снижены до 0,2 мг/кг массы. Снижение доз позволяет избежать возникающие в отдельных случаях гипераллергические реакции у собак.

Использование препарата у кошек (64 экземпляра) при панлейкопении (кошачий вирусный энтерит), кальцевирусной инфекции, при другой патологии: дерматомикозе и т.п. имеет свои особенности. В первую очередь введение вестина (ридостина) в схему лечения болезней кошек требует снижения дозы препарата в 10 раз по сравнению с собаками, которая и составляет 0,05-0,1 мг/кг массы. Рекомендуется сочетание вестина (ридостина) с пангаматом кальция (витамин В₁₅) или липоевой кислотой.

Курс лечения препаратом как собак, так и кошек при ежедневном инъекционном применении составляет 3-4 дня подряд.

Результаты оценки эффективности применения препарата вестин (ридостин), полученные ранее на стадии лабораторных исследований, изложеные в табл. 1, приведены в качестве сравнения. Представленные данные демонстрировали, что применение вестина перспективно для лечения различных форм чумы, наблюдаемых нами у собак. Препарат применяли на фоне общепринятых способов лечения, что указывало на его хорошую сочетаемость с другими фармпрепаратами. Однако высокие дозы вестина (ридостина), применявшиеся ранее для лечения от 0,44 до 1,3 мг/кг, вызывали в большинстве случаев аллергические реакции у собак, что и послужило основанием для снижения терапевтических доз.

Суммируя данные, можно видеть, что введение вестина в дозах 0,2 -1 мг/кг внутримышечно в зависимости от тяжести заболевания при курсе лечения от 3 до 7 дней позволяет достичь средней эффективности при чуме собак 92,5%, а при парвовирусном энтерите 84%. Профилактическое применение вестина (ридостина) проводится в тех же дозах, но требует однократного инъекционного введения препарата.

Существенным при лечении собак, больных чумой, препаратом вестин (ридостин) является учет их биоритмологических особенностей. Так однократное применение препарата вечером в дозе 0,5 мг/кг в течение 3 суток является наиболее эффективным. Эффективность отмечали по нормализации физиологических показателей: температуре тела, частоте сердечных сокращений, дыханию и другим показателям.

Отмечено, что при введении препарата вечером по сравнению с утренним применением и традиционным лечением, заболевание протекало в в более легкой форме, а позитивные изменения в составе крови были более выражены.

В результате широких производственных испытаний полирибоната подтверждено, что этот препарат является также, как и вестин, эффективным стимулятором неспецифической резистентности у различных животных и птиц.

Препарат способен повышать эффективность вакцинации БЦЖ у телят против туберкулеза, у жеребят против мыта лошадей, поросят против сальмонеллеза, собак против вирусных болезней. Наиболее эффективной при этом является двукратное использование препарата в дозе 1 мг/кг с интервалом 10-15 дней.

Применение полирибоната (поливедрима) в качестве стимулятора неспецифической резистентности у различных животных основано на способности препарата корректировать иммунодефициты в организме.

Важными являются положительные результаты применения препарата у глубокостельных коров и новорожденных телят, а также использование его в птицеводстве. В этих случаях схема применения и дозы препарата остаются неизменными и только у стельных коров доза полирибоната снижается (0,1 мг/кг). Пониженные дозы препарата требуются для введения кошкам, поскольку известно, что эти животные являются высоко реагирующими организмами.

Впервые препарат стал применяться как стимулятор неспецифической резистентности у плотоядных (собак и кошек) в ветеринарных клиниках г. Барнаул и г. Новосибирск . С целью повышения эффективности вакцинации собак против вирусных заболеваний препарат применяли согласно наставления в тех же дозах, что и для телят и поросят (1 мг/кг). При этом исключаются поствакцинальные реакции и повышается эффективность иммунизации.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Препарат вестин (ридостин) является этиотропным противовирусным средством экстренной профилактики и эффективной терапии у широкого круга позвоночных животных: млекопитающих, птиц, рыб.

Препарат способен подавлять вирусы разных семейств. Препарат может использоваться как в профилактических, так и лечебных схемах у сельскохозяйственных, домашних и лабораторных животных при различных способах введения.

Препарат обладает иммуномодулирующими свойствами: способен повышать эффективность противовирусных и антибактериальных вакцин, стимулировать процессы восстановления и неспецифической резистености при иммунодефицитных состояниях, активизировать процессы роста и развития животных.

Определены эффективные дозы препарата и разработаны оптимальные схемы его применения у различных животных:

у молодняка крупного рогатого скота:

- для лечения ассоциированных диарей, вирусного и бактериального происхождения вестин 8 мг/гол, в/м, раз в сутки, 3 дня подряд совместно с пробиотиками: субалином, ветомом 1.1, бактерином-SL и др.;

- для лечения микоплазмоза телят вестин в дозе 0,06 мг/кг, в/м, совместно с левотетрасульфином в дозе 0,4 мл/кг, один раз в сутки; лечение повторяется через 15 дней;

- для профилактики и лечения риновирусной инфекции телят вестин вводят в дозе 0,1-0,5 мг/кг, в/м, двукратно через 3 дня;

- для усиления эффективности вакцинации против туберкулеза животных телятам до 12-ти суток вводят БЦЖ (в дозе 0,5 мг/кг согласно наставлению) совместно с вестином в дозе 0,5 мг/кг, в/м, однократно;

у поросят в качестве противовирусного средства и стимулятора неспецифической резистентности в ранний постнатальный и послеотъемный период:

- для профилактики и лечения острой вспышки ассоциированных гастроэнтеритов, обусловленной колибактериозом, ВТГЭ, ротавирусной инфекцией и др. вестин в дозе 0,5 мг/кг, в/м, 1 раз в сутки, 3 раза через 3 дня;

- для профилактики гастроэнтеритов в период отъема вестин в дозе 0,5 мг/кг, в/м, 1 раз в сутки, за 3 дня до отъема и в день отъема;

- для повышения эффективности вакцинации КЧС в очаге вместе с вакциной ЛК ВНИИВиМ (10-кратная доза) вестин в дозе 0,5 мг/кг, в/м, 1 раз 40-60-дневным поросятам, повтор на 80-95 день вакцина+вестин в тех же дозах;

- для повышения эффективности вакцинации против сальмонеллеза вакциной ТС-177 по 1 мл + вестин в дозе 0,5 мг/кг, в/м, на 45 день; повтор через 15 дней вакцина + вестин в тех же дозах;

- для повышения эффективности вакцинации против сальмонеллеза концентрированной формол-вакциной в дозе 2 мл/гол, в/м, один раз, вестин через 7 дней после вакцины, трижды с интервалом 3 дня: первая инъекция 1 мг/кг, в/м, вторая и третья - 0,5 мг/кг;

у плотоядных для этиотропной терапии вирусных болезней и предотвращения вторичных инфекций, стимуляции специфической и неспецифической резистентности:

- у собак всех пород при чуме, парвовирусном энтерите, аденовирозе, гепатите, пироплазмозе и др. вестин вводут в дозе 0,1-0,5 мг/кг массы, в/м, 1 раз в день вечером, 3-4 дня подряд в сочетании с общепринятой терпией; для профилактики вестин вводят в дозе 2 мг/гол, в/м, двукратно через 3 дня;

- у кошек при панлейкопении, кальцевирозе и других инфекциях вестин вводят в/м в дозе 0,05-0,1 мг/кг, 1 раз в день, 3 раза подряд. Можно сочетать с пангаматом кальция (В₁₅) или липоевой кислотой;

у лабораторных животных вестин может применяться в качестве профилактического противовирусного средства в инфекционном очаге и для получения безвирусных племенных ядер при разведении:

-мыши в дозе 0,1 мг/кг, в/бр, однократно;

-крысы в дозе 0,5 мг/кг, в/м, однократно;

-морские свинки в дозе 0,5 мг/кг, в/м, однократно;

-кролики в дозе 0,05-0,1 мг/кг, в/м, профилактически однократно, при заболеваниях - трехкратно через 3 дня;

-обезьяны в дозе 8 мг/кг, в/м, профилактически однократно, при заболеваниях - 3-4 раза через 3 дня;

у птиц в качестве стимулятора роста и неспецифической резистентности, противовирусного средства при содержании племенных ядер:

-цыплята-бройлеры, цыплята яйценоских пород - вестин в дозах 1-2 мг/кг при различных способах введения (внутримышечном, интраназальном, конъюнктивальном, окулярном), при аэрозольном способе обработки.

Полирибонат является стимулятором неспецифической резистентности: обладает способностью увеличивать количество антителообразующих клеток, содержание Т-лимфоцитов, стимулировать гемопоэз, активизировать функцию макрофагов и нейтрофилов, проявляет иммуноадъювантные свойства при совместном использовании с антибактериальными и противовирусными вакцинами, а также вызывает ростостимулирующие эффекты.

Полирибонат применяют с целью стимуляции неспецифической резистентности и роста телят, поросят, птицы, повышения эффективности вакцинации телят против туберкулеза, поросят против сальмонеллеза, жеребят против мыта, а также для профилактики и лечения желудочно-кишечных и респираторных заболеваний сельскохозяйственных и домашних животных.

Полирибонат вводят внутримышечно в форме раствора, приготовленного с соблюдением стерильности на дистиллированной воде или физиологическом растворе из расчета 10 мг в 1мл. Раствор хранят не более суток.

Для повышения резистентности и стимуляции роста препарат применяют: сухостойным коровам в дозе 0,1 мг/кг за 30 и 15 дней до отела; телятам в дозе 1 мг/кг с 10-дневного возраста двукратно через 10 дней; поросятам-отъемышам полирибонат вводят в дозе 1 мг/кг с интервалом 7 дней; цыплятам-бройлерам с 10-дневного возраста препарат применяют 4-кратно через каждые 7 дней в дозе 1 мг/кг при различных способах введения.

Для повышения эффективности вакцинации против туберкулеза телятам в возрасте 12 суток вводят вакцину БЦЖ (согласно наставлению) в сочетании с полирибонатом: первый раз одновременно с вакциной, второй раз в той же дозе (без вакцины) через 10-15 дней; иммунизацию жеребят против мыта лошадей проводят на 2-3 день после отъема и через 14 дней повторяют. Вакцину вводят внутримышечно в область лопатки в дозе 2 мл, полирибонат вносят в вакцину перед инъекцией из расчета 1 мг/кг массы животного.

При вакцинации поросят против сальмонеллеза полирибонат вводят в дозе 1 мг/кг вместе с вакциной, через 10-15 дней делают повторную вакцинацию и введение препарата в тех же дозах.

Для повышения эффективности вакцинации против вирусных болезней и предотвращения поствакцинальных реакций собакам полирибонат вводят в дозе 1 мг/кг, кошкам - 0,1 мг/кг .

Для увеличения эффективности вакцинации у птиц препарат вводят однодневным цыплятам внутримышечно, в дозе 0,02 мг/голову вместе с вакциной против болезни Марека.

Литература

1. Therapeutic application of double-stranded RNAs/Greene J.J., Ts'o P.O.P., Strayer D.R., Carter W.A.//Interferons and their Applications. Ed. Came P.E., Carter W.A. Berlin e.a.: Springer, 1984. XXIV - P.535-555.

2. Сравнительное изучение противовирусной активности природных двуспиральных РНК при экспериментальном клещевом энцефалите /Кнорроз М.Ю., Попова О.М., Давыдова А.А. с соавт.//Вопр. вирусол. - 1985. - Т. 30, N 6. - С. 697-700.

3. Сравнительное исследование индукторов интерферона, полученных из природных источников/И.В.Тимофеев, С.Р.Чаплыгина, В.В.Зорин и др.//Антибиотики и мед.биотехнология. - 1987. - Т.32, N2. - C.144-147.

4. Индукторы интерферона/А.С.Садыков, Ф.И.Ершов, А.С.Новохатский и др. - Ташкент: Фан, 1978. - 305 с.

5. Вирусология: в 3-х т. Т. 2:/Под ред. Б.Филда, Д.Найта и др.//- М.: Мир, 1989. - 496 с.

6. Жданов В.М., Ершов Ф.И. Роль интерферона в гомеостазе//Вопр. вирусологии. - 1983. - T.28, N 6. - C.757-761.

7. Смирнов С.П., Крашенинникова Л.В., Пухальский В.А. Эффект синтеза молекул двунитевой РНК в трансгенных растениях табака на устойчивость к вирусу табачной мозаики//ДАН. - 1993. -Т.331, N2. - C.241-245.

8. Снигирев С.Н. Показатели половозрастной и породной восприимчивости собак к чуме//Диагностика, лечение и профилактика инфекционных болезней животных Казахстана. - Алма-Ата, 1989. - С.60-63.

9. Чижов В.А., Данилов Е.П., Дукур Н.Н. Инфекционные болезни/Болезни собак: Справочник//А.Д.Белов, Е.П.Данилов, Н.Н.Дукур и др.- М.: Агропромиздат, 1990. - С.259-318.

10. Афанасьев П.Е., Логинов Г.Г. Парвовирусный энтерит//Ветеринария. - 1991. - N5. - C.64-68.

11. Климов А.А. Аденовирусы собак//Ветеринария. - 1991. - N 3. - C.64-65.

12. Очистка и свойства гексонового антигена аденовируса собак серотипа CAV-1/Л.В.Верховская, В.Н.Уласов, Е.К.Киселева и др.//Биохимия. - 1990. - T.55, N 11. - C.1996-2001.

13. Whetstone C.A. Monoclonal antibodies to canine adenovirus 1 and 2 that are type-specific by virus neutralization and immunofluorescence//Vet.Microbiol. - 1988. - Vol.16, N.1. - P.1-8.

14. Large and small plague variants of canine adenovirus 2 isolate/Y.Tokya, M.Azetaka, E.Takahashi, S.Kanishi//Japan J.Vet.Sc. - 1989. - Vol.51, N.6. - P.1267-1269.

15. Whetstone C.A., Draayer H., Collins J.E. Characterization of canine adenovirus type 1 isolated from American black bear//Am.J.Veter.Res. - 1988. - Vol.49, N.6. - P.778-780.

16. Baer G.M., Brooks R.C., Foggin C.M. Oral vaccination of dogs fed canine adenovirus in baits//Amer.J.Vet.Res. - 1989. - Vol.50, N.6. - P.836-837.

17. Oral administration of an attemeated strain of canine adenovirus (type 2) to racoons, foxes, skunk, and mongoose/J.W.Sumner, J.H.Shaddock, Guang-Jer Wu, G.M.Baer//Am.J.Vet.Res. - 1988. - Vol.49, N.2. - P.169-171.

18. Outbreak of neonatal canine herpesvirus infection in a specific pathogen free beagle colony/A.Kojima, F.Fujinami, M.Takeshita e.a.//Japan J.Veter.Sc. - 1990. - Vol.52, N.1. - P.145-154.

19. Demonstration of canine herpesvirus - specific hemagglutination/K.Nemoto, T.Horimoto, X.Xuan e.a.//Japan J.Veter.Sc. - 1990. - Vol.52, N.2. - P.395-398.

20. Restriction endonuclease analysis of canine herpesviruses isolated in Japan/X.Xuan, T.Horimoto, M.Ono e.a.//Japan J.Veter.Sc. - 1990. - Vol.52, N.6. - P.1181-1188.

21. Serodiagnosis of canine herpesvirus infection - development of an enzyme-linked immunosorbent assay and its comparison with two improved methods of serum neutralization test/A.Takumi, K.Kusanagi, K.Tushiya e.a.//Japan J.Veter.Sc. - 1990. - Vol.52, N.2. - P.241-250.

22. Rota P.A., Maes R.K. Homology between feline herpesvirus-1 and canine herpesvirus//Arch.Virol. - 1990. - Vol.115, N.1/2. - P.139-145.

23. Canine coronavirus vaccine: Пат. 4824785 США. МКИ 4 А 61 K 39/12/W.M.Acree, B.Edwards, J.W.Black. Опубл. 25.04.89.

24. Canine coronavirus vaccine: Пат. 4904468 США. МКИ 4 А 61 K 39/12/M.A.Gill, S.W.May. Опубл. 27.02.90.

25. Патоморфологични проучвания при кучета, експериментално заразени с вируса на инфекциозния хепатит/М.Александров, Р.Тодорова, С.Христозова, С,Андреев//Проблеми имунитета специфичната. Профилактика селскостоп. Животни Птици. - София, 1988. - T.2. - C.252-260.

26. Опити за получаване на хиперимунен серум против инфекциозния хепатит по кучето/С.Христозова, Р.Тодорова, С.Андреев, М.Трайкова// Проблеми имунитета специфичната. Профилактика селскостоп. Животни Птици. - София,1988. - T.2. - C.196-200.

27. Уласов В.И., Гельман Б.Г., Селиванов А.В. Реакция гемагглютинации при инфекционном гепатите собак//Контроль и стандартизация средств специф. профилактики и диагностики туберкулеза, бруцеллеза и вирусн. болезней животных. - Москва, 1988. - С.122-125.

28. Инфекционный гепатит плотоядных у щенков собак/А.В.Селиванов, В.И.Уласов, Е.Д.Захарова, А.П.Плотвинова//Контроль и

стандартизация средств специф. профилактики и диагностики тубер-

кулеза, бруцеллеза и вирусн. болезней животных. - Москва, 1988. -

С.149-152.

29. Урбан В.П., Найманов И.Л. Болезни молодняка в промышлен-

ном животноводстве. - М.: Колос, 1984. - 207 с.

30. Макаров В.В., Чевелев С.Ф. Вирусы как причины вторичных

иммунодефицитов животных//Вопр.вирусологии. -1984.- T.29, N 2.

-C.148-152.

31. Сoliform septicemia and pulmonary disease assotiated

with canine parvoviral enteritis: 88 cases (1987-1988)/J.Turk,

M.Miller, T.Brown et al.//J. Am. Veter. Med. Assn. - 1990. -

Vol.196, N5. - P.771-773.

32. Lymphocytic-plasmocytic enteritis in 24 dogs/G.Jacobs,

L.Coleins-Kelly, M.Lappin et al.//J. Veter. Internal. Med. -

1990. - Vol.4, N2. - P.45-53.

33. Hall E.J. Primary treatment of small intestinal disea-

ses//Veter. ann. London etc. - 1989. - Iss.29. - P.226-231.

34. Weiss H.-E., Bertle F. Therapie antibiotikaresistenter

E.coli. - Enteritiden bei Hunden und Katzen durch oral applizier-

te Autovakzinen//Prakt. Tierarzt. - 1991. - Jg.72, N1. - S.12-16.

35. Baljer G., Hinsch F., Mayr B. Klinische erfahrungen mit

der zwingerspezifischen E.coli - Schluckimpfung bei Huden//Tierarztl. Praxis. - 1990. - Jg.18, N1. - S.65-68.

36. Nosocomial diarrhea assotiated with enterotoxigenic

Clostridium perfringens infection in dogs/S.A.Kruth, J.F.Pres-

cott, M.K.Welch et al.//J. Am. Veter. Med. Assn. - 1989. -

Vol.195, N3. - P.331-334.

37. Симонович В.Н., Бондаренко В.В. Парвовирусный энтерит

собак (профилактика, лечение)//Ветеринария. - 1991. - N.12. -

C.65-66.

38. Untersuchungen zur biologischen. Characterisieung des

Staupevirusstammes D 84-1/A.Neubert, G.Durner, L.Neubert

u.a.//Mh. Veter.-Med. -1991. -Jg.46, N10. - S.376-381.

39. Fecal incontinence, urinary incontinence, and priapism

associated with multifocal distemper encephalomyelitis in a

dog/W.G.Guilford, D.P.Shaw, D.P.O'Bren et al.//J. Am. Veter. Med.

Assn. - 1990. - Vol.197, N.1. - P.90-92.

40. Sorjonen D.C., Cox N.R., Swango L.J. Electrophoretic

determination of albumin and gamma globulin concentrations in the

cerebrospinal fluid of dogs with encephalomyelitis attributable

to canine distemper virus infection: 13 cases (1980-1987)//J. Am.

Veter. Med. Assn. - 1989. - Vol.195, N7. - P.977-980.

41. Palmer D.G., Huxtable C.R.R., Thomas J.B. Immunohistoc-

hemical demonsration of canine distemper virus antigen as an aid

in the diagnosis of canine distemper encephalomyelitis//Res. in

veter. Sc. - 1990. - Vol.49, N2. - P.177-181.

42. Morikawa Y., Yoshikawa Y., Yamanouchi K. Reversion of

neurovirulence and in vitro phenotype of neural cell-adapted ca-

nine distemper virus after passage in non-neural cells//Microbi-

ol. and Immunol. - 1988. - Vol.32, N 12. - P.1263-1268.

43. Дымин Н.А., Черных Н.В., Дымина Г.П. Применение цитоло-

гических исследований культур клеток CV-1 для определения инфек-

ционной активности вируса чумы плотоядных//Диагностика, патомор-

фология, патогенез и профилактика болезней в промышленном живот-

новодстве. - Саратов, 1990. - Ч.2. - С.180-182.

44. Schmidt P., Hafner A., Reubel G.N. Production of anti-

bodies to canine distemper virus in chicken eggs for immunoce-

mistry//J.Veter.Med.Ser.B. - 1989. - Vol.36, N.9. - P.661-668.

45. Bystander demyelination through antibody induced mac-

rophage activation in canine distemper virus infection/C.Griot,

T.Burge, M.Vandevelde, E.Peterhans//Schweiz.Arch.Neurol.und Psyc

hiat. - 1989. - Vol.140, N.1. - P.39-41.

46. Experimental inoculation of Beagle dogs permits serolo-

gical differentiation of phocine and canine distemper virus/M.Ja-

ger, B.Liess, T.Harder e.a.//Wien tierartzl.Wschr. - 1990. -

Jg.77, H.4. - S.105-108.

47. Carmichael L.E., Schlafer D.H., Hashimoto A.Pathogeni-

city of minute virus of canines (MCV) for the canine fetus//Cor-

nel Veter. - 1991. - Vol.81, N.2. - P.151-171.

48. Antiviral antibodies stimulate production of reactive

oxygen species in cultured canine brain cells infected with cani-

ne distemper virus/T.Burge, C.Griot, M.Vandevelde, E.Peter-

hans//J.Virol. - 1989. - Vol.63, N.6. - P.2790-2797.

49. Vries P.De., Uytdehaag F.G.C.M., Osterhaus A.D.M.E. Ca-

nine distemper virus (CDV) immune-stimulated complexes (Iscoms),

but not measls virus Iscoms, protect dogs against CDV infecti-

on//J.Gen.Virol. - 1988. - Vol.69, N.8. - P.2071-2083.

50. Berns K.J. Parvovirus replication//Microbiol. Revs. -

1990. - Vol.54, N3. - P.316-329.

51. Induction of anti-viral immune response by immunization

with monoclonal anti-idiotype antibodies directed to private idi-

otopes/A.D.M.E.Osterhaus, G.K.Rimmelzwaam, K.Welier et al.//Vi-

ral. Immunol. - 1989. - Vol.2, N4. - P.255-262.

52. Evaluation of enzyme-linked immunosorbent assays based

on monoclonal antibodies for the serology and antigen detection

in canine parvovirus infections//G.F.Rimmelzwaan, N.Juntti,

B.Klingeborn e.a.// Veter.Q. - 1990. - Vol.12, N.1. - P.14-20.

53. Lacheretz A., Lejour A. Diagnostic ELISA de la parvovi-

rose canine sensibilite, spesificit interference vaccina-

le//Rev.Med.Veter. - 1990. - Vol.141, N.819. - P.647-653.

54. Gaag G., van der Happe R.P. Follow-up studies by pero-

ral small intestinal biopsies and necropsy in dogs with chronic

diarrhea// J.Veter.Med.Ser.A. - 1990. - Vol.37, N.8. - P.561-568.

55. Van der Broek A.H.M. Serum protein electrophoresis in

canine parvovirus enteritis//Brit.Veter.J. - 1990. - Vol.146,

N.3. - P.255- 259.

56. Experimentelle parvovirusinfektion von Hundewelpen Im-

munhistologische Befunde/I.Vlemmas, P.Wolsein, G.Trantwein

e.a.//Berl. und munch.tierartztl.Wschr. - 1990. - Jg.103, H.12. -

S.422-425.

57. Vergleich von diagnostischen Verfahren zur Untersuchung

auf Parvo- und Rotavirusinfektionen des Hundes/S.Kolbe, I.Vogel,

M.Modli, F.Gerstl//Berl.und munch.tierartztl.Wschr. - 1990. -

Jg.103, H.7. - S.232-236.

58. Максимов Н.А., Сабирзянова Т.Н. Лечение собак при чу-

ме//Ветеринария. - 1991. - N 3. - C.63-64.

59. Соколов В.Д., Андреева Н.Л., Соколов А.В. Иммуностиму-

ляторы в ветеринарии//Ветеринария. - 1992. - N 7-8. - C.49-50.

60. Беляев В.Н., Сартасов Е.Л. Т-активин - стимулятор роста

поросят//Ветеринария. - 1992. - N 7-8. - C.50-51.

61. Иммуностимулятор достим/А.Н.Федорова, Т.О.Тюрина,

Н.А.Картушина и др.//Ветеринария. - 1992. - N 1. - C.31-32.

62. Гуславский Н.Н., Снигирев С.Н. Сравнительная эффектив-

ность вакцин 668-КФ и "Вакчум" в специфической профилактике чумы

собак//Диагностика, лечение и профилактика инфекционных болезней

животных Казахстана. - Алма-Ата, 1989. - С.64-68.

63. Kutschmann K., Peter W., Stolz A. Zur Problematik der

Parvovirusimpfung beim Hund//Mh.Veter.Med. - 1990. - Jg.45, H.22.

- S.779-782.

64. Untersuchungen uber die Wirksamkeit und Unschadlichkeit

einer Schutzimpfung gegen Parvovirose bzw. Tollwut bei narkotisi-

erten Hundewelpen/B.Mayr, A.Honig, F.Gutbrod, C.Wiedemann//Tie-

rarztl.Praxis. - 1990. - Jg.18, H.2. - S.165-169.

65. Goddard R.D., Nickolas R.A.J., Luff P.R. Inactivated

canine parvovirus vaccines: An alternation method for assessment

of potency//Veter.Rec. - 1990. - Vol.126, N.20. - P.497-499.

66. Franke V., Danner K. Zur Wirksamkeit von Candur P//Kle-

intiepraxis. - 1990. - Jg.35, H.7. - S.335-336, 338.

67. Olson P., Kligeborn B., Hedhammar A. Serum antibody

response to canine parvovirus, canine adenovirus-1, and canine

distemper virus in dogs with known status of immunization: Study

of dogs in Sweden//Amer.J.Veter.Res. - 1989. - Vol.49, N.9. -

P.1460-1466.

68. The possible enhancement of parvovirus vaccination on

the mortality rate of diseased dogs/J.Brenner, R.Markus, U.Klop-

fer-Orgad, Z.Trainin//J.Veter.Med.Ser.B. - 1989. - Vol.36, N.7. -

P.547-550.

69. Отчет о НИР "Изучить активность индукторов интерферона

на животных" (Заключительный отчет) ВГНКИ ГУВ МСХ N 0286.0 36401,

ВНТЦИ - М., 1985. - 20 с.

70. Mechanisms of fever induced by recombinant human inter-

feron/Dinarello C.A., Bernheim H.A., Le Hung 1 0V. et al.// J. Clin.

Invest. - 1984. - V.74, N3. - P.906-913.

71. Duff G.W., Durum S.K 1. 0 The pyrogenic and mitogenic acti-

ons of interleukin-1 are related//Nature.- 1983.- V.304.- P.-449.

72. Fontana A., Weber E., Dayer J.-M 1. 0 Synthesis of interle-

ukin 1/endogenous pyrogen in the brain of endotoxin-treaed mice:

a step in fever induction?//J. Immunol. - 1984. - V.133, N4. -

P.1696-1698.

73. Агасаров Л.Г., Сорокин А.В., Уханова И.К 1. 0 Образование

эндогенного пирогена мононуклеарными фагоцитами//Бюл. экспер. би-

ол. и мед. - 1984. - Т. XCVII, N 7. - C.24-26.

74. Арутюнян Р.А. Роль 7a 0- и 7b 0-адренорецепторов гипоталамуса

в гипертермическом эффекте простагландина F 42 7a 0.//Физиол. ж. СССР

им. И.М.Сеченова. - 1985. - Т. LXXI, N 7. - C. 835-839.

75. Продукция интерлейкина-1 и простагландинов моноцитами

периферической крови человека/Ковальчук Л.В., 1 0Чередеев А.Н., 1 0Из-

векова В.А 1. 0 и др.//Лаб. дело. - 1986. - N 11. - C. 657-660.

76. Романовский А.А., Григорьев В.А. Изменение биоэлектро-

химической активности нейросекреторных ядер гипоталамуса при ли-

хорадке, вызываемой эндогенным пирогеном/ интерлейкином-1//Физи-

ол. ж. СССР им И.М.Сеченова. - 1988. - T. LXXIV, N 12. - C.

1731-1737.

77. Yerushalmi A., 1 0Tovey M.G., Gresser I. Antitumor effect

of combined interferon and hyperthermia in mice (41367) //Proc.

Soc. Exp. Biol .Med. - 1982. - V.169, N3. - P. 413-415.

78. Mullbacher A. Hyperthermia and the generation and acti-

vity of murine influenza-immune cytotoxic T cells in vitro//J.

Virol. - 1984. - V.52, N3. - P.928-931.

79. Simon 1 0H.B. The immunology of exercise. A brief revi-

ew//JAMA. - 1984. - V.252, N19. - P.2735-2738.

80. Hirai N., Hill 1 0N.O., Osther K. Temperature influences

on different human alpha interferon activities// J. Interferon

Res. - 1984. - V.4, N4. - P.507-516.

81. Postic B., Arroyo J.C 1. 0 Prospects for the medical use of

interferon in 1984//Henry Ford Hosp. Med.J.- 1984.- V.32, N2. -

P.116-122.

Сайт управляется системой uCoz