Влияние геля гиалуроновой кислоты на интерфероногенез у мышей
Н.Н. Шкиль, А.Г. Глотов, Т.И. Глотова, В.И. Масычева,* Е.Д. Даниленко*
Государственное научное учреждение
Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока,
*Государственный научный центр
Научно исследовательский конструкторско-технологический институт биологических активных веществ “Вектор”,
Введение
Заболевания вирусно-бактериальной нозологии были и остаются наиболее значимыми в общей структуре заболеваний человека и животных. Применение вакцин, специфических иммуноглобулинов, антибиотиков и других химиопрепаратов в своё время сыграло решающую роль в борьбе с инфекционными заболеваниями. Однако известно, что все они экологически небезопасны и могут вызывать аутоиммунные заболевания, дисбактериозы, аллергии и прочие побочные действия. Кроме того, терапевтических эффект многих препаратов наступает в течении длительного срока, а так же связан с не всегда удобным пероральным способом введения.
В связи с этим в последнее время растёт интерес к экологически безопасным препаратам, с высокой скоростью наступления терапевтического эффекта и удобной формой применения. В ГНЦ ВБ НИКТИ БАВ “Вектор” разработана мазевая форма (“Ринусин-ново”) широко применяемого препарата “вестин” (индуктор интерферона) на основе дсРНК из дрожжей Saccharamyces cerevisia. В последнее время ряд авторов [2-4] отмечают комплексное воздействие (иммуностимулирующее, антибактериальное, регулирующее обмен веществ) интерферона на организм. Одним из возможных способов усилениея эти свойств, является включение в состав комплексного препарата гиалуроновой кислоты (ГК), которая блокирует некоторые молекулярные факторы воспаления (CD44, RHAMM) [5,6], обладает противоопухолевыми свойствами [3], активирует метоболизм и пролиферацию клеток [1]. Неотемлимым преимуществом мазевой формы препарата является её простота, безболезненность и широкий спектр применения среди пациентов при гриппе, герпесе и других вирусных заболеваниях.
В настоящем эксперименте, нами изучено влияние компонентов мазевой формы дсРНК и геля гиалуроновой кислоты на показатели интерфероногенеза в различных концентрациях.
Материалы и методы
В опыте по изучению интерферона были использованы белые мыши массой 16-18 г линии ICR. Подопытным животным были введены внутрибрюшинно дсРНК и гель гиалуроновой кислоты в различных сочетаниях и концентрациях. Для изучения новой формы препарата – иммуностимулятора сформировали 6 групп мышей (n=6), которым вводили различные концентрации и сочетания дсРНК и геля гиалуроновой кислоты (ГК) в объёме 0,2мл внутрибрюшинно.
Группы подопытных животных:
6. ДсРНК 0,15% + гель ГК 1,0%
Для проведения изучения динамики интерфероногенеза использовали реакцию нейтрализации (РН) в культуре клеток мышиных фибробластов линии L929. В качестве индикаторного был избран вирус везикулярного стоматита (ВВС) шт.Indiana. Для культивирования монослоя культуры клеток была использована среда Игла МЕМ (ГНЦ ВБ “Вектор”) с добавлением фетальной сыворотки плодов крупного рогатого скота 5-10% (“Биолот”). Снятие монослоя культуры клеток и рассев в культуральные плашки “Costar” производили с применением раствора Версена ГНЦ ВБ “Вектор” и хемотрипсином ОАО “Татхимфармация” в соотношении (1:9).
Собственные исследования
Средний титр интерферона в сыворотке крови мышей в группе, где применяли дсРНК 0,15% составил 1:33,3. Анализируя полученные результаты можно отметить отсутствие интерферониндуцирующей способности у геля гиалуроновой кислоты как в 0,5%, так и в 1,0% концентрации. В то же время, исследования чётко показали выражённую зависимость выработки интерферона дсРНК от наличия разных концентраций гиалуроновой кислоты. Так, сочетание дсРНК 0,15% и геля ГК 0,5% индуцировали выработку интерферона в среднем по группе в 1:138,6, а при увеличении концентрации геля ГК до 1,0% и дсРНК 0,15% титр интерферона поднимается в среднем до 1:226,6. В данном случае можно полагать, что гиалуроновая кислота косвенно влияет на индукцию интерферона путём активации внутриклеточного метоболизма, пролиферации, адгезии, репарации и миграции клеток.
Ранее проведённые исследования, позволяют судить так же и о прямом, непосредственном влиянии геля ГК на динамику инфероногенеза. Так, установлено [4,6], что в развитии активации Т-клеток ведущую роль играют IL-2 и IL-15, которые в свою очередь активируют гиалуронан эндотелиальных клеток капиляров. Активация CD44 гиалуронаном является ключевым в активации и регуляции лимфоцитов и моноцитов. Т-клетки и моноциты являются основными индукторами интерферона активация которых приводит к его повышенному синтезу.
Итак, подводя итог наших исследований можно констатировать, что наиболее приемлемой композицией препарата является сочетание дсРНК 0,15% и геля ГК 1,0% , так как у подопытных мышей этой группы наблюдали наивысшую индукцию уровня интерферона по сравнению с животными других групп.
Таким образом, выполненные экспериментальные исследования позволили разработать перспективную лекарственную форму высокоэффективного индуктора интерферона, активность которого потенциировалась действием геля ГК.
Литература
Мы проводим экологические исследования популяций собак и кошек, заполните пожалуйста нашу aнкетуЭто нужно для того, чтобы научится мирному сосуществованию с ними, сократить до минимума уничтожение бездомных животных, повысить эффективность борьбы с инфекциями